培养稳定的细胞株主要有2种方法
培养稳定的细胞株有以下2种方法：一是脂质体转染后，单克隆筛选稳定细胞株。二是应用逆转录病毒，慢病毒转染，筛选稳定细胞株。
脂质体转染：在转染24小时后，消化细胞并计数。将细胞种到96孔板，保证每个孔2-3个细胞，这样才能得到单克隆。待细胞贴壁后，加入抗生素筛选。筛选时间和浓度视细胞而定。一般一个星期作用，快则2-3天。但脂质体法筛单克隆时间较长，且效率低，大概只有1%。
病毒转染：先要用包装细胞，一般为293细胞，包装出病毒，再用病毒转染目的细胞。包装病毒视不同类型的病毒而定，一般要3-5天的时间。包装好的病毒要测滴度，根据滴度决定转染目的细胞的病毒量。转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株。
细胞株是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高 胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶；在细胞冻存时加入温保护剂，能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO，在冻结前透出细胞外，可以减少冰晶对细胞的损伤。细胞株的储藏：
1.先将冻存管放入4℃冰箱，约40分钟。
2.接着置于-20℃冰箱，约30-60分钟。
3.置于-80℃超低温冰箱中放置过夜。
4.置于液氮罐中长期保存。
5.做好冻存记录，在笔记本和冻存记录本上都要记录。
细胞株培养时应注意的事项：
1、对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行。
2、细胞株实验开始前，无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌，并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后，再进行实验操作。培养基完全相同也不可共用培养基，以避免细胞间污染或失误混淆。
3、实验完成后，请将实验物品拿出工作台，操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后，才能进行下一个细胞株的操作。
4、实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成，请勿在边缘非无菌区域进行操作。
5、请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处，也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后，请用手夹住瓶盖并轻握瓶身，尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
6、操作过程中，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等。
在购买细胞株应注意的问题：
由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰（一般在13公斤以上），采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。报关时尽量提供比较充足的证明材料，以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡。在购买细胞株之前要一定要详细阅读厂家细胞株的培养说明书。
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