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不同分类的的PCR仪工作原理一样吗

发布时间:2015-07-17

  PCR仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学众多行业,有用户就会问到我们的PCR仪工作原理的问题,问工作原理是否相同,下面就来为您具体介绍下。
  (1)普通基础PCR仪
  一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫做普通基础PCR仪。普通基础PCR仪由主机,加热模块,PCR管,热盖,控制软件组成。
  基础PCR仪主要适用于分子生物学、医学临床诊断、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(PicymeraseChainReaction,PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种及基因分析。
  (2)梯度PCR仪
  在一次性PCR扩增中可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常12种温度梯度,这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其最适退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出扩增量高的最适退火温度,进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。
  梯度PCR仪,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。和普通基础PCR仪一样,梯度PCR仪可用于医学,食品,司法,科研,教学等领域。
  (3)实时荧光定量PCR仪
  在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,叫做实时荧光定量PCR技术,也称real-timeQ-PCR。
  其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。
  荧光定量PCR仪是在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,与普通PCR仪,梯度PCR仪相比,无需做电泳分析,实验一步检测完成。荧光检测系统主要包括激发光源和检测器。激发光源有卤钨灯光源、氩离子激光器、发光二极管LED光源,前者可配多色滤光镜实现不同激发波长,而单色发光二极管LED价格低、能耗少、寿命长,不过因为是单色,需要不同的LED才能更好地实现不同激发波长。监测系统有超低温CCD成像系统和PMT光电倍增管,前者可以一次对多点成像,后者灵敏度高但一次只能扫描一个样品,需要通过逐个扫描实现多样品检测,对于大量样品来说需要较长的时间。




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  • 不同分类的的PCR仪工作原理一样吗
  • 发布时间:2015-07-17 00:00
  •   PCR仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学众多行业,有用户就会问到我们的PCR仪工作原理的问题,问工作原理是否相同,下面就来为您具体介绍下。
      (1)普通基础PCR仪
      一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫做普通基础PCR仪。普通基础PCR仪由主机,加热模块,PCR管,热盖,控制软件组成。
      基础PCR仪主要适用于分子生物学、医学临床诊断、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(PicymeraseChainReaction,PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种及基因分析。
      (2)梯度PCR仪
      在一次性PCR扩增中可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常12种温度梯度,这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其最适退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出扩增量高的最适退火温度,进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。
      梯度PCR仪,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。和普通基础PCR仪一样,梯度PCR仪可用于医学,食品,司法,科研,教学等领域。
      (3)实时荧光定量PCR仪
      在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,叫做实时荧光定量PCR技术,也称real-timeQ-PCR。
      其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。
      荧光定量PCR仪是在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,与普通PCR仪,梯度PCR仪相比,无需做电泳分析,实验一步检测完成。荧光检测系统主要包括激发光源和检测器。激发光源有卤钨灯光源、氩离子激光器、发光二极管LED光源,前者可配多色滤光镜实现不同激发波长,而单色发光二极管LED价格低、能耗少、寿命长,不过因为是单色,需要不同的LED才能更好地实现不同激发波长。监测系统有超低温CCD成像系统和PMT光电倍增管,前者可以一次对多点成像,后者灵敏度高但一次只能扫描一个样品,需要通过逐个扫描实现多样品检测,对于大量样品来说需要较长的时间。

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