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细胞株的鉴定、管理和使用
发布时间:2013-11-29
近些年,当一个细胞系或细胞林建成后,我国常通过组织专家开鉴定会的形式予以鉴定,从学术角度考虑,此举实非必要。按国际惯例,只要研究认真负责地把有关资料在杂志或刊物上报道,详细介绍上述各项目即可。
以前因未建立统一的细胞库时,对已建立的细胞株多由作者单位自行保管,有浪费人力、交流使用不便、细胞易污染和丢失等弊病。我国已初建成小规模贮存细胞机构,待获进一步发展,这对我国细胞培养必将有更大促进作用。
国际上美、英和日本等国已建有细胞库;美国已有美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)和人遗传突变细胞库(HGMR)、细胞衰老细胞库(CAR)等,其中ATCC不仅是美国也世界最大的细胞库。ATCC下属有一组协作实验室和一个由众多专家组成的咨询委员会。ATCC也是美国国立癌症研究所(NCI)和美国卫生研究所中(NIH)的资源库,尤与NCI有密切的关系。ATCC也是世界卫生组织WHO的国际培养细胞文献中心。ATCC现液氮冻存有3200个已经过鉴定的细胞系(1992),其中包括来自正常人和各种疾病患者的皮肤成纤维细胞系;和来自不同物种的近75个杂交瘤细胞株。ATCC接纳来自世界各国已经鉴定的细胞予以贮存,同时也向世界各国的研究者或实验室免费提供研究用细胞(做盈利性研究时收费。) ATCC接纳入库细胞时,必须符合其入库标准,ATCC入库细胞要求检测项目如下:
培养简历:组织来源日期、物种、组织起源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态、细胞已传代数等
冻 存 液:培养基和防冻液名称
细胞活力:融解前后细胞接种存活率和生长特性
培 养 液:培养基种类和名称(一般要求不含抗生素)、血清来源和含量
细胞形态:类型,如为上皮或成纤维细胞等,融解后细胞生长特性
核 型:二倍体或多倍体,标记染色体的有无
无污染检测:包括细菌、真菌、支原体、原虫和病毒等
物种检测:检测同工酶,主要为G6PD和LDH,以证明细胞有否交叉污染以及反转录酶检测
免疫检测:一两种血清学检测
细胞建立者:建立者姓名;检测者姓名
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